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CRISPR指導(dǎo)RNA
Edit-R™預(yù)設(shè)計(jì)的指導(dǎo)RNA
保證 編輯靶基因
合成sgRNA
一份指南格式-非常適合復(fù)雜,難以編輯的單元格類型
合成crRNA
適用于大多數(shù)細(xì)胞類型的有效編輯-必須與合成tracrRNA一起使用
慢病毒sgRNA
對(duì)于不適合轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型,穩(wěn)定的指導(dǎo)RNA表達(dá)
多合一慢病毒sgRNA
將sgRNA和Cas9表達(dá)整合到單個(gè)載體中
指導(dǎo)RNA對(duì)Cas9核酸酶進(jìn)行編程以在特定的基因組位置進(jìn)行切割。有效的指導(dǎo)RNA的設(shè)計(jì)對(duì)于實(shí)現(xiàn)有效的基因敲除關(guān)重要。
所有Edit-R預(yù)先設(shè)計(jì)的指導(dǎo)RNA產(chǎn)品均采用經(jīng)過驗(yàn)證的算法進(jìn)行設(shè)計(jì),以大程度地發(fā)揮功能性蛋白敲除的可能性,而不僅僅是產(chǎn)生雙鏈斷裂。通過評(píng)估成千上萬(wàn)個(gè)設(shè)計(jì)的表型,然后在其他分析系統(tǒng)中驗(yàn)證我們的設(shè)計(jì)規(guī)則,我們建立了確定目標(biāo)位點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn),這些位點(diǎn)更有可能實(shí)現(xiàn)高特異性的功能敲除。
也可以使用CRISPR設(shè)計(jì)工具為其他物種,替代核酸酶或基因內(nèi)的任何特定區(qū)域定制合成和慢病毒指導(dǎo)RNA 。對(duì)于使用金黃色葡萄球菌Cas9用于切割的設(shè)計(jì)指南RNA,地平線建議NEB恩根® 秀Cas9您核酸。
CRISPR-Cas9系統(tǒng)中的指導(dǎo)RNA
除了表達(dá)Cas9核酸酶外,CRISPR-Cas9系統(tǒng)還需要特定的RNA分子來(lái)募集核酸酶活性并將其定向到目標(biāo)區(qū)域。這些指導(dǎo)RNA采取以下兩種形式之一:
合成的反式激活CRISPR RNA(tracrRNA)加上合成的CRISPR RNA(crRNA),旨在切割感興趣的基因靶位點(diǎn)(圖1a)
由crRNA和tracrRNA組成的合成或表達(dá)的單向?qū)NA(sgRNA)作為單個(gè)構(gòu)建體(圖1b)
微小RNA(miRNA)
研究microRNA的功能以及它們與miRNA調(diào)節(jié)試劑有關(guān)的途徑。、
預(yù)先設(shè)計(jì)的miRNA調(diào)節(jié)試劑
miRIDIAN microRNA模擬物
為功能獲得研究補(bǔ)充內(nèi)源性microRNA活性
miRIDIAN microRNA發(fā)夾抑制劑
抑制miRNA活性以研究功能喪失的影響
shMIMIC慢病毒微RNA
表達(dá)的慢病毒microRNA具有多個(gè)啟動(dòng)子和報(bào)告基因選項(xiàng)
shMIMIC誘導(dǎo)型慢病毒微RNA
業(yè)界具創(chuàng)新性的成熟microRNA表達(dá)系統(tǒng),結(jié)合一代強(qiáng)大的Tet誘導(dǎo)技術(shù)
定制miRNA合成
定制的microRNA調(diào)節(jié)工具
修改現(xiàn)有的microRNA模仿物或抑制劑,靶向新型microRNA,或要求Accell microRNA抑制劑或穩(wěn)定化模仿物用于特殊應(yīng)用。
microRNA調(diào)節(jié)簡(jiǎn)介
miRNA是非編碼RNA,可通過一種機(jī)制介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄后基因調(diào)控,該機(jī)制涉及RISC介導(dǎo)的與哺乳動(dòng)物靶基因3'UTR中互補(bǔ)序列的結(jié)合。miRNA通過不完善的序列互補(bǔ)性與靶向信使RNA(mRNA)結(jié)合,從而導(dǎo)致mRNA不穩(wěn)定和翻譯減弱。由于轉(zhuǎn)錄本的miRNA靶向是通過部分序列互補(bǔ)來(lái)指導(dǎo)的,因此每個(gè)miRNA都可能調(diào)節(jié)數(shù)百個(gè)基因。
在獲得功能和喪失功能的實(shí)驗(yàn)中,對(duì)miRNA水平的調(diào)節(jié)不僅是了解microRNA功能的方法,也是了解它們可能參與的途徑的基本方法。
microRNA模擬
miRIDIAN microRNA模擬物是化學(xué)合成的合成雙鏈RNA分子,旨在模擬Dicer加工產(chǎn)生的內(nèi)源性雙鏈體。一鏈代表在miRBase數(shù)據(jù)庫(kù)版本21.0中注釋的成熟miRNA 。使用專有的ON-TARGET plus修改可確保僅將所需的成熟鏈加載到RISC中。miRIDIAN microRNA模擬物需要使用類似于siRNA的方法(轉(zhuǎn)染試劑,電穿孔等)遞送到細(xì)胞中。人類,小鼠和大鼠中的每種miRNA均可使用單獨(dú)的試劑。預(yù)定義的篩選庫(kù)可用于人類和小鼠??梢酝ㄟ^我們的定制microRNA網(wǎng)絡(luò)工具訂購(gòu)定制miRNA。在物種可用性,設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)和添加化學(xué)修飾方面提供更大的靈活性。還可以使用Cherry-pick Library Plater生成并訂購(gòu)自定義的后光線。
shMIMIC慢病毒microRNA和shMIMIC慢病毒誘導(dǎo)型microRNA 構(gòu)建體是慢病毒載體,其編碼天然microRNA序列以實(shí)現(xiàn)外源導(dǎo)入的microRNA表達(dá)?;讷@得專li的SMARTvector慢病毒shRNA平臺(tái),它們針對(duì)高功能表達(dá)進(jìn)行了優(yōu)化,并確保鏈偏向,從而僅加載代表成熟miRNA序列的特異性靶向鏈。借助SMARTchoice的額外靈活性啟動(dòng)子和報(bào)道基因的選擇,可以按多種構(gòu)型訂購(gòu)構(gòu)建體,以確保獲得佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在miRbase數(shù)據(jù)庫(kù)21.0版中,所有人,小鼠和大鼠microRNA的高滴度純化慢病毒顆粒均可以使用單獨(dú)的構(gòu)建體;合并的篩選文庫(kù)也可用于本構(gòu) 和可誘導(dǎo) 形式的人和小鼠。也可以在此處訂購(gòu)定制的篩選庫(kù)。
microRNA抑制劑
將microRNA抑制劑引入生物系統(tǒng)會(huì)導(dǎo)致功能喪失分析,并預(yù)測(cè)內(nèi)源性miRNA功能會(huì)下降。miRIDIAN microRNA發(fā)夾抑制劑 是合成的單鏈RNA分子,旨在抑制內(nèi)源性miRNA活性。它們是一代的專有合成抑制劑。正在申請(qǐng)專li的分子結(jié)合了化學(xué)修飾和全新的二級(jí)結(jié)構(gòu)基序,從而增強(qiáng)了效力和壽命。這允許在非常低的納摩爾濃度下以小的毒性對(duì)多重microRNA進(jìn)行抑制。在miRBase數(shù)據(jù)庫(kù)版本21.0中,可為人類,小鼠和大鼠中的每個(gè)成熟miRNA提供單獨(dú)的試劑。和預(yù)定義的抑制劑篩選庫(kù) 適用于人類和小鼠。還可以通過使用Cherry-pick Library Plater創(chuàng)建和訂購(gòu)自定義的后燈。
北京華新康信生物科技有限公司Dharmacon品牌下產(chǎn)品種類繁多,不僅以下列出明細(xì),如若想找尋理想產(chǎn)品,可以電聯(lián),竭誠(chéng)為您服務(wù)。
產(chǎn)品貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 品牌 代理公司
M-006093-01-0005 Raf-1 antibody (E-10) Dharmacon
M-006097-01-0005 KRAS Antibody (Biotin) Dharmacon
D-001830-01-05 ON-TARGETplus GAPD Control siRNA (Human) Dharmacon
D-001810-01-05 ON-TARGETplus Non-targeting siRNA Dharmacon代理 北京華新康信生物科技有限公司
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