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常見(jiàn)問(wèn)題 - RUO細(xì)胞因子
每個(gè)產(chǎn)品的相關(guān)信息均在該產(chǎn)品隨附的CoA(說(shuō)明書(shū))中,請(qǐng)仔細(xì)閱讀這些信息,以獲知溶解和存儲(chǔ)的方法。如果您在閱讀CoA后仍需要了解更多信息,請(qǐng)查看以下問(wèn)題和答案,或與我們的質(zhì)量保證(QA)部門(mén)聯(lián)系
1. 你們的蛋白產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何?
除非在產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中特別注明,我們的所有產(chǎn)品均為凍干粉,在室溫條件下非常穩(wěn)定。盡管如此,我們還是建議您將凍干產(chǎn)品保存在-20oC至-80oC。
對(duì)于大多數(shù)產(chǎn)品,重懸后在4oC僅能短期保存。如想長(zhǎng)期保存,請(qǐng)用含載體蛋白(如0.1% BSA)的溶液稀釋已重懸的蛋白,然后分裝、凍存于-20oC至-80oC。分裝濃度要求不低于1 µg/ml,每管體積要求不小于10µl。
務(wù)必注意,請(qǐng)避免反復(fù)凍融,因每次凍融均可能引起蛋白的部分變性。因此,我們建議分裝的蛋白溶液凍融不要超過(guò)1次。
2. PeproTech重組蛋白的內(nèi)毒素水平如何?
PeproTech大部分無(wú)動(dòng)物成分級(jí)別蛋白的內(nèi)毒素水平均保證低于0.01 ng/µg蛋白,即0.1 EU/µg蛋白。對(duì)于大多數(shù)非無(wú)動(dòng)物成分級(jí)別的蛋白,內(nèi)毒素水平保證低于0.1 ng/µg蛋白,即1 EU/µg。其實(shí),許多蛋白的實(shí)際內(nèi)毒素含量均低于上面標(biāo)稱的內(nèi)毒素水平,具體信息請(qǐng)與我們的質(zhì)量保證(QA)部門(mén)聯(lián)系。
3. 為什么我在管中看不到蛋白團(tuán)塊?
與市場(chǎng)上的許多蛋白產(chǎn)品不同,PeproTech的產(chǎn)品中不含任何載體蛋白和其它添加物 (如BSA, HSA和蔗糖等),因此在凍干時(shí)微量的蛋白可能會(huì)在管內(nèi)形成一個(gè)薄層,有時(shí)肉眼不可見(jiàn)。我們建議,在打開(kāi)管蓋前用小離心機(jī)快速離心20-30秒,使附著在管蓋或管壁上的蛋白團(tuán)塊聚集于管底。盡管可能看不到蛋白團(tuán)塊,但我們的質(zhì)控程序保證每管中的蛋白含量準(zhǔn)確無(wú)誤。
4. 哪些細(xì)胞因子有種屬交叉活性?
除少數(shù)例外,大多數(shù)人細(xì)胞因子對(duì)小鼠細(xì)胞均有活性,很多小鼠細(xì)胞因子也可作用于人,但反應(yīng)的特異性可能低于對(duì)應(yīng)的人細(xì)胞因子。干擾素,GM-CSF, IL-3和IL-4等細(xì)胞因子的種屬特異性很強(qiáng),與其它種屬細(xì)胞的交叉反應(yīng)活性非常弱。相反,成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素(neurotrophins)等高度保守,在不同動(dòng)物種屬細(xì)胞上均呈現(xiàn)良好的生物學(xué)活性。
5. ED50和units/mg均用來(lái)表示比活性(specific activity),兩者之間有什么關(guān)聯(lián)?
ED50的定義是可誘導(dǎo)50%最大反應(yīng)的細(xì)胞因子濃度,而比活性(specific activity)是單位重量蛋白樣品中所含的活性單位。比活性單位(Specific Activity Units)只能用于表示蛋白的效能,且僅適用于劑量反應(yīng)曲線為S形的蛋白。以ng/ml為單位的ED50和以units/mg為單位的比活性之間的換算公式為:
6. 比活性單位(specific activity units)和活性的國(guó)際單位(International Units)之間有什么關(guān)聯(lián)?
比活性單位和國(guó)際單位(IU)之間沒(méi)有直接的關(guān)聯(lián),不能相互換算。
國(guó)際單位(IU)是與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品的活性單位(即IU/ng)比對(duì)后得出的活性數(shù)值,后者是在世界衛(wèi)生組織(WHO)領(lǐng)導(dǎo)的國(guó)際合作研究中確定的。WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品由英國(guó)國(guó)家生物制品檢定所(NIBSC)制備和提供。
簡(jiǎn)單地與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)而得出的蛋白活性國(guó)際單位(IU)常會(huì)出現(xiàn)偏差,原因是每個(gè)蛋白廠家所用的活性檢測(cè)方法很難一致,從而導(dǎo)致與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)后得到的國(guó)際單位(IU)值相互間不具可比性。想要實(shí)現(xiàn)真正的可比性,必須建立標(biāo)準(zhǔn)的活性檢測(cè)方法,以保證所得出的蛋白活性國(guó)際單位(IU)值僅與蛋白的質(zhì)量有關(guān),而與蛋白的來(lái)源無(wú)關(guān)。
7. PeproTech是怎樣得到蛋白活性的國(guó)際單位(IU)值的?
在可能的情況下,PeproTech通過(guò)將自己的產(chǎn)品與對(duì)應(yīng)的WHO標(biāo)準(zhǔn)品在自已的生物活性測(cè)試中進(jìn)行多次平行比對(duì)來(lái)得出國(guó)際單位(IU)值。多次對(duì)比可保證我們能夠排除因測(cè)試本身的不穩(wěn)定性(如產(chǎn)品批次,使用方法和測(cè)試方案等的變異性)而導(dǎo)致的異常值的出現(xiàn)。經(jīng)多次比對(duì)得出的結(jié)果可對(duì)我們產(chǎn)品的國(guó)際單位(IU)值進(jìn)行可靠的定量。
重組人類(lèi)FGF-10
6評(píng)論
產(chǎn)品詳情
產(chǎn)品編號(hào):
100-26
產(chǎn)品描述:
FGF-10是肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子,屬于FGF家族。該家族的蛋白質(zhì)通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化,在產(chǎn)前發(fā)育,產(chǎn)后生長(zhǎng)和各種組織再生中起著核心作用。FGF-10與KGF / FGF-7相關(guān),并在發(fā)育過(guò)程中表達(dá),優(yōu)先在成年肺中表達(dá)。它通過(guò)FGFR 2b發(fā)出信號(hào)。重組人FGF-10是一種19.3 kDa的蛋白質(zhì),由170個(gè)氨基酸殘基組成。
來(lái)源:
大腸桿菌
同義詞:
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子10,FGFA,角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子2
AA順序:
MLGQDMVSPE ATNSSSSSFS SPSSAGRHVR SYNHLQGDVR WRKLFSFTKY FLKIEKNGKV SGTKKENCPY SILEITSVEI GVVAVKAINS NYYLAMNKKG KLYGSKEFNN DCKLKERIEE NGYNTYASFN WQHNGRQMYV ALNGKGAPRR GQKTRRKNTS AHFLPMV
純度:
SDS-PAGE凝膠和HPLC分析結(jié)果≥95%。
生物活性:
測(cè)定#1:使用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒8(CCK-8)通過(guò)表達(dá)FGF受體的BaF3細(xì)胞的脫氫酶活性,通過(guò)劑量依賴性的還原四唑鎓鹽WST-8的能力來(lái)確定。預(yù)期的ED 50為5 ng / ml,對(duì)應(yīng)于≥2 x 10 ^ 6單位/ mg的比活。
測(cè)定#2:通過(guò)使用4MBr-5細(xì)胞的細(xì)胞增殖測(cè)定來(lái)確定。該作用的預(yù)期ED50為0.5-15.0 ng / ml。
計(jì)算分子量:
19.3 kDa的
登記號(hào):
O15520
基因編號(hào):
2255
筆記:
1mg將作為2x500μg提供。
交叉反應(yīng):
雞,狗,人的,小鼠,大鼠,蛇
原產(chǎn)地: 美國(guó)
不供人類(lèi)使用。
生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子
該產(chǎn)品類(lèi)別包含人類(lèi),鼠類(lèi)或大鼠序列的細(xì)胞外蛋白,這些蛋白在大多數(shù)情況下會(huì)通過(guò)細(xì)胞表面受體引發(fā)或影響信號(hào)傳導(dǎo)。此處列出的產(chǎn)品包括人,鼠和大鼠白介素,集落刺激因子,生長(zhǎng)因子,干擾素,脂肪因子,BMP蛋白,FGF,TNF,可溶性受體,細(xì)胞外結(jié)合蛋白,非抑制性絲氨酸蛋白酶抑制劑和其他免疫調(diào)節(jié)蛋白。
重組人/鼠/大鼠激活素A(大腸桿菌衍生)
2評(píng)論
產(chǎn)品詳情
產(chǎn)品編號(hào):
120-14E
產(chǎn)品描述:
激活素A是TGF-β家族成員,具有廣泛的生物學(xué)活性,包括調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和分化以及促進(jìn)神經(jīng)元存活。人類(lèi)結(jié)直腸腫瘤和絕經(jīng)后婦女中的激活素A水平升高分別與結(jié)直腸癌和乳腺癌有關(guān)。激活素A的生物活性可以被抑制素和可擴(kuò)散的TGF-β拮抗劑卵泡抑素所抵消。激活素A結(jié)合兩種形式的激活素受體I型(Act RI-A和Act RI-B)和兩種形式的激活素受體II型(Act RII-A和Act RII-B)。激活素是不同β亞基的同二聚體或異二聚體。它們以具有氨基末端前肽的前體蛋白形式產(chǎn)生,該氨基末端前肽被裂解以釋放C末端生物活性配體。
來(lái)源:
大腸桿菌
同義詞:
抑制素β-1,FRP,FSH(促卵泡激素)釋放蛋白,類(lèi)紅細(xì)胞分化因子(EDF)
AA序列(單體):
GLECDGKVNI CCKKQFFVSF KDIGWNDWII APSGYHANYC EGECPSHIAG TSGSSLSFHS TVINHYRMRG HSPFANLKSC CVPTKLRPMS MLYYDDGQNI IKKDIQNMIV EECGCS
純度:
SDS-PAGE凝膠和HPLC分析結(jié)果≥97%。
生物活性:
根據(jù)其抑制鼠MPC-11細(xì)胞增殖的能力確定的ED 50為≤2.0 ng / ml,比活性為≥5 x 10 5單位/ mg。
計(jì)算分子量:
26 kDa的
登記號(hào):
08
基因編號(hào):
3624
筆記:
1mg將作為2x500μg提供。
交叉反應(yīng):
雞,狗,青蛙,人類(lèi),人類(lèi)+小鼠,猴子,小鼠,豬,大鼠
原產(chǎn)地: 美國(guó)
不供人類(lèi)使用。
預(yù)包被ELISA試劑盒
PeProTech品牌的BioGems很高興提供預(yù)包被的ELISA試劑盒,這些試劑盒是完整且經(jīng)過(guò)優(yōu)化的即用型免疫測(cè)定方法,其中包括一個(gè)96孔帶狀板,該板預(yù)涂了對(duì)目標(biāo)抗原具有特異性的抗體。每個(gè)試劑盒還包含重組蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,生物素化的檢測(cè)抗體,以及易于使用的比色檢測(cè)所需的緩沖液和試劑。
人B7-1預(yù)涂ELISA試劑盒
產(chǎn)品詳情
產(chǎn)品編號(hào):
BGK33681
產(chǎn)品描述:
B7-1和B7-2是免疫球蛋白超家族的跨膜糖蛋白,與CD28和CTLA4受體一起通過(guò)抗原呈遞細(xì)胞表達(dá),并與這些受體一起構(gòu)成T細(xì)胞和B細(xì)胞調(diào)節(jié)的關(guān)鍵共刺激途徑回應(yīng)。作為B7家族的成員,B7-1和B7-2在免疫中起主要作用,通過(guò)與CD28和CTLA4結(jié)合來(lái)激活免疫反應(yīng)并維持免疫耐受性。B7-1和B7-2與CD28相互作用產(chǎn)生的共刺激信號(hào)可刺激T細(xì)胞活化,并通過(guò)T細(xì)胞受體(TCR)信號(hào)的放大來(lái)防止無(wú)反應(yīng)。相反,配體與CTLA-4的相互作用可通過(guò)破壞B7亞型結(jié)合的CD28復(fù)合物的刺激信號(hào)來(lái)維持T細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和自我耐受性,并在T細(xì)胞中誘導(dǎo)強(qiáng)大的抑制信號(hào)。B7-1通過(guò)在外周炎癥部位擴(kuò)增和調(diào)節(jié)T細(xì)胞活性而在免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。然而,B7-1和CTLA-4一樣,僅在靜止的樹(shù)突狀細(xì)胞上表達(dá)不佳,因此其上調(diào)在免疫激活后會(huì)大大延遲。相反,B7-2和CD28分別由靜息的造血細(xì)胞和T細(xì)胞組成性表達(dá),因此能夠在免疫激活后迅速誘導(dǎo)上調(diào),使它們對(duì)免疫應(yīng)答的早期共刺激信號(hào)至關(guān)重要。已顯示B7-1和B7-2均在體外T細(xì)胞增殖中表現(xiàn)出共刺激活性,并在體內(nèi)引起增強(qiáng)的抗腫瘤免疫應(yīng)答。BioGems人B7-1預(yù)包被的ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種固相免疫測(cè)定法,專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)用于用96孔帶狀板測(cè)量B7-1,該板預(yù)涂了對(duì)B7-特異的小鼠單克隆抗體1。它包含NS0表達(dá)的重組B7-1。檢測(cè)抗體是對(duì)B7-1特異的生物素化山羊多克隆抗體。該試劑盒已通過(guò)即用型試劑的分析驗(yàn)證。
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